鹽酸土霉素片—鹽酸土霉素的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸土霉素片中鹽酸土霉素（C₂₂H₂₄N₂O₉ ·HCl)的含量。

本方法適用于鹽酸土霉素片。

供試品制成0.01mol/L鹽酸溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)280nm處檢測(cè)鹽酸土霉素吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 0.05mol/L草酸銨溶液

2. 二甲基甲酰胺

3. 0.2mol/L磷酸二氫銨溶液（用磷酸調(diào)pH值至2.5±0.05)

4. 0.1mol/L鹽酸溶液

5. 0.01mol/L鹽酸溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（pH值適應(yīng)范圍應(yīng)大于8.0)，理論塔板數(shù)按土霉素峰計(jì)算不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.05mol/L草酸銨溶液 二甲基甲酰胺 0.2mol/L磷酸二氫銨溶液=75 20 5，用氨試液調(diào)節(jié)pH值至8.0±0.2。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品10片，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于土霉素100mg)，置200mL量瓶中。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取25mg，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并制成每1mL含2.5mg的溶液，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

將供試品加0.1mol/L鹽酸溶液20mL使溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置50mL量瓶中，加0.01mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)280nm處測(cè)定土霉素的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.463。