牛膝—胡蘿卜甙的含量測(cè)定方法—HPLC

儀器   Jascopu-908高效液相色譜輸液泵和Jasco PU-975紫外-可見檢測(cè)器（日本分光公司)CKChrom色譜工作站（Scientiflc System Inc)，3550酶標(biāo)儀（Bio-Rad)，1H- NMR BrukerAARX-300（300MHz)（日本產(chǎn))

色譜條件   色譜柱：APEXODS柱（250 mm×4.6 mm，5μm，JONES Chromatography)；流動(dòng)相：水-乙腈（70∶30)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20 μL

對(duì)照品溶液制備    精密稱取胡蘿卜甙適量，以甲醇-氯仿（1∶1)溶液并稀釋制成0.2 mg/mL的溶液。內(nèi)標(biāo)溶液的配制：精密量取非那西汀對(duì)照品適量，用甲醇溶液并稀釋成0.8 mg/mL。

供試品溶液制備   精密稱取牛膝粉末（40目篩)1 g，置燒瓶中，以75 %乙醇回流提取3次（每次10 mL)，將提取液減壓濃縮得醇浸膏，將浸膏溶于水10 mL混旋，混旋液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以乙酸乙脂萃取3次（每次10 mL)，合并萃取液，回收溶劑，以甲醇—氯仿（1∶1)轉(zhuǎn)入10 mL量瓶中，再?gòu)牧科恐腥〕? mL溶液置于另一10 mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液非那西汀1 mL，以甲醇-氯仿（1∶1)稀釋置刻度，搖勻，微孔濾膜（0.45 μm)濾過，取續(xù)濾液即得供試品溶液。