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鵝病免費(fèi)咨詢:水禽衣原體病的確診方法有哪些?

水禽衣原體病的確診方法有哪些?
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(1)病料采集采集剛死亡禽新鮮的肝、脾、心肌以及胸腔、腹腔和心包腔中的分泌物等病料。(2)染色鏡檢將肝、脾、心肌等做觸片,或?qū)⑿馗骨坏确置谖镒鐾科,用姬姆薩染色鏡檢,衣原體呈紫色。(3)病原分離將上述病料磨細(xì)用滅菌生理鹽水做1:5—1:10稀釋懸液,適量加入抗生素如鏈霉素,或卡那霉素,或萬古霉素,每毫升1000~2 000單位,但不能加青霉素。置4℃冰箱過夜,經(jīng)l000轉(zhuǎn)/分,離心10~15分鐘,取中間清液作為病原分離材料。①雞胚接種接種用的雞胚要求來源于不飼喂抗生素,尤其是四環(huán)素類、青霉素以及無衣原體感染雞群。胚齡為6~8日齡,卵黃囊接種,每枚0.1~0.2毫升。置37~38℃繼續(xù)孵育8~10天。72小時(shí)內(nèi)死亡弁去,對(duì)以后死亡雞胚逐個(gè)取卵黃囊膜壓片染色檢查有無衣原體。陽性的卵黃囊膜經(jīng)細(xì)菌檢查陰性者作雞胚傳代或供其他試驗(yàn)用。如第一代未發(fā)現(xiàn)衣原體,應(yīng)再傳2~3代檢查。雞胚多于接種后5~6天死亡,卵黃膜充血,絨尿膜水腫。②小白鼠接種15克左右小白鼠腹腔接種。腹腔內(nèi)腹水大增,并集聚大量纖維蛋閂性滲出物,使腹部膨大,不能行走而死亡。脾臟腫大,是檢驗(yàn)、保存、傳代農(nóng)原體的首選器官。也可用腦內(nèi)和鼻內(nèi)接種。此外,也可用豚鼠接種。③細(xì)胞接種 許多細(xì)胞株如Vero、BHK21、Hela229、BGM、MoCoy等以及雞胚繼代細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。本病原體能在雞胚細(xì)胞產(chǎn)生蝕斑。在接種后3天,有60%-70%細(xì)胞受感染,即可用染色檢查到衣原體。④血清學(xué)檢查用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)方法檢查發(fā)病初期和康復(fù)期抗體滴度,當(dāng)抗體滴度增加4倍,即可判陽性。此外,也可用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、瓊脂雙擴(kuò)交叉試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)等方法。
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實(shí)驗(yàn)室檢測診斷
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實(shí)驗(yàn)室檢測
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