近20年來(lái)分子克隆技術(shù)的發(fā)展突飛猛進(jìn)，重組DNA操作技術(shù)包括的范圍不斷擴(kuò)大，DNA克隆的方法亦多種多樣，特別是PCR技術(shù)的應(yīng)用，以及RFLP、SSCP等技術(shù)的開(kāi)展，使得DNA克隆技術(shù)的應(yīng)用日益廣泛。
DNA克隆技術(shù)在動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的病因及診療研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因發(fā)生的特異突變時(shí)，可以設(shè)計(jì)合成擴(kuò)增引物，進(jìn)行模板DNA的PCR擴(kuò)增，所得的PCR產(chǎn)物較小，僅有300多bp，且純度不足以進(jìn)測(cè)序。為了對(duì)此突變序列進(jìn)行測(cè)序分析，就可以采用DNA克隆的方法，將此PCR產(chǎn)物連接到www.med126.com細(xì)菌質(zhì)粒上，再進(jìn)一步純化后測(cè)序，以便鑒定脂蛋白酯酶的突變序列。
下面簡(jiǎn)要介紹DNA克隆和測(cè)序的常用方法。
