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醫(yī)學微生物學:第一節(jié) 概述

一、生物學性狀(一)形態(tài)染色與結構多形態(tài),球桿狀或桿狀,0.3~0.6×0.8~2.0um?驴怂贵w最小,平均大小為0.25×1um,多形性更明顯。最大者為斑點熱群,為0.6×1.2um。在感染細胞內(nèi),立克次體常聚集成致密團塊狀,但也可成單或bhskgw.cn/wsj/成雙排列。不同立克…

一、生物學性狀

(一)形態(tài)染色與結構

多形態(tài),球桿狀或桿狀,0.3~0.6×0.8~2.0um?驴怂贵w最小,平均大小為0.25×1um,多形性更明顯。最大者為斑點熱群,為0.6×1.2um。在感染細胞內(nèi),立克次體常聚集成致密團塊狀,但也可成單或bhskgw.cn/wsj/成雙排列。不同立克次體在細胞內(nèi)的分布不同,可供初步識別。如普氏立克次體常散在于胞質(zhì)中,恙蟲病立克次體在胞質(zhì)近核旁,而斑點熱群立克次體則在胞質(zhì)和核內(nèi)均可發(fā)現(xiàn)。

革蘭氏染色陰性,但一般著染不明顯,因此常用Giemnez、Giemsa 或Macchiavello法染色,其中以Gimenez法最好。該法著染后,除恙蟲病立克次體呈暗紅色外,其他立克次體均呈鮮紅色。Giemsa法和Macchiavello法分別將立克次體染成紫或藍色和紅色。

立克次體在結構上與革蘭氏陰性桿菌非常相似。用電子顯微鏡觀察,最外層為由多糖組成的粘液層,有粘附宿主細胞及抗吞噬作用。其內(nèi)為微莢膜或稱外包膜,由多糖或脂多糖組成。細胞壁包括外膜(磷脂雙分子層)、肽聚糖及蛋白脂類三層。有與細菌內(nèi)毒素性質(zhì)相似的脂多糖復合物,但脂類含量比一般細菌高得多。胞漿膜為雙層類脂,主要由磷脂組成。胞質(zhì)內(nèi)有核糖體(由30s和50s兩個亞基組成)。核質(zhì)集中于中央,含雙股DNA。

(二)培養(yǎng)特性

立克次體具有相對較完整的能量產(chǎn)生系統(tǒng),能氧化三羧酸循環(huán)中的部分代謝產(chǎn)物,有較獨立的呼吸與合成能力,但仍需人宿主細胞中取得輔酶A、NAD及代謝中所需的能量才能生長繁殖。除戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體外,其他立克次體都為嚴格的真核細胞內(nèi)寄生。

常用的培養(yǎng)方法有動物接種、雞胚接種及細胞培養(yǎng)。多種病原性立克次體能在豚鼠、小鼠等動物體內(nèi)有不同程度的繁殖。在豚鼠睪丸內(nèi)保存的立克次能保持致病力和抗原性不變。立克次體還能在雞胚卵黃囊中繁殖,常用作制備抗原或疫苗的材料。常用的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)有敏感動物的骨髓細胞、血液單核細胞和中性粒細胞等,一般不產(chǎn)生細胞病變。一般認為宿主細胞的新陳代謝不太旺盛時有利于立克次體的生長繁殖,因此接種立克次體以32~35℃孵育最為適宜。

表17-1對人類致病的立克次體

生物型DNA的G+Cmol%細胞內(nèi)定位抗原結構媒介儲存宿主所致疾病外斐氏反應
可溶性抗原顆粒性抗原
立克次體屬斑疹傷寒普氏立克次體29胞漿內(nèi)群特異性種特異性流行性斑疹傷寒OX19
  莫氏立克次體29胞漿內(nèi)群特異性種特異性鼠類地方性斑疹傷寒OX19
  加拿大立克次體29核內(nèi)群特異性種特異性?類似斑點熱?不明
 斑點熱群立氏立克次體33胞漿內(nèi)和核內(nèi)群特異性種特異性各種嚙齒類、狗、鳥類落磯山斑點熱OX19,OX2
  西伯利亞立克次體33胞漿內(nèi)和核內(nèi)群特異性種特異性嚙齒類、家畜、鳥類北亞熱OX19,OX2
  康氏立克次體33胞漿內(nèi)和核內(nèi)群特異性種特異性嚙齒類、狗鈕扣熱OX19,OX2
  澳大利亞立克次體33胞漿內(nèi)和核內(nèi)群特異性種特異性嚙齒類、有袋動物、家鼠、田鼠昆士蘭熱OX19,OX2
  小株立克次體33胞漿內(nèi)和核內(nèi)群特異性種特異性革螨嚙齒類、有袋動物、家鼠、田鼠立克次痘陰性
 恙蟲病群恙蟲病立克次體?胞漿內(nèi)株特異性種與型特異性恙螨各種嚙齒類、小哺乳類恙蟲病OX
柯克斯體屬 貝納氏柯克斯體43~45胞漿空泡內(nèi)種特異性野生小動物、羊、牛Q熱陰性
羅沙利巴體屬 戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體39胞外種特異性種特異性戰(zhàn)壕熱陰性

只有戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體能在節(jié)肢動物細胞外生存,并在無細胞培養(yǎng)基中生長。

(三)抗原結構

立克次體有兩種主要抗原,一種為可溶性(醚類)抗原,耐熱,與細胞壁表面的粘液層有關,為群特異性抗原。另一種為顆粒(外膜)性抗原,不耐熱,與細胞壁成份有關,為種特異性抗原。

在斑疹傷寒群,群特異性抗原在普氏、莫氏及加拿大立克次體中均存在,與其他屬的立克次體很少交叉或不交叉,而種特異性蛋白抗原在上述三個種間互不交叉。

斑點熱群的情形與比相似,有共同的群特異性抗原及各個種的種特異性抗原,后者在某些種間有一定的交叉。

恙蟲病群中只有恙蟲病立克次體一個種,其群特異性抗原即種特異性抗原,根據(jù)恙蟲病立克次體種特異性抗原性的差異,可分為若干血清型。

斑疹傷寒等立克次體具有與變形桿菌某些X株的菌體抗原(O)共同的耐熱多糖類抗原(表17~2),因而臨床上常用以代替相應的立克次體抗原進行非特異性凝集反應,作為人或動物血清中相關抗體的檢查。這種交叉凝集試驗稱為外斐反應(Weii-Felix reaction),作為輔助診斷。

表17-2 主要立克次體與變形桿菌菌株抗原交叉現(xiàn)象

立克次體變形桿菌菌株
OX19OX2OXK
普氏立克次體
莫氏立克次體
恙蟲病立克次體
Q熱柯克斯體
戰(zhàn)壕熱羅沙利馬體
+++
+++
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
+++
-
-

(四)抵抗力

除貝鈉(Q熱)柯克斯體外,立克次體對理化因素的抵抗力與細菌繁殖體相似。56℃30分鐘死亡;室溫放置數(shù)小時即可喪失活力。對低溫及干燥的抵抗力強,在干燥虱糞中能存活數(shù)bhskgw.cn/wszg/月。對一般消毒劑敏感,對四環(huán)素氯霉素敏感;前奉愃幬锊粌H不能抑制反而促進立克次體的生長、繁殖。

二、致病性與免疫性

立克次體的致病物質(zhì)已證實的有兩種,一種為內(nèi)毒素,由脂多糖組成,具有與腸道桿菌內(nèi)毒素相似的多種生物學活性。另一種為磷脂酶A,可分解脂膜而溶解細胞,導致宿主細胞中毒。

立克次體感染的傳播媒介是節(jié)肢動物,如虱、蚤、蜱、螨等。虱、蚤的傳播方式是含大量病原體的糞便在叮咬處經(jīng)搔抓皮損處侵入人體;蜱、螨傳播則是由叮咬處直接注入體內(nèi)。進入人體后,立克次體首先侵入局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細胞內(nèi),即經(jīng)過吸附細胞膜上受體而被吞入胞內(nèi),再由磷脂酶A溶解吞噬體膜的甘油酸而進入胞質(zhì),隨后分裂繁殖,導致細胞腫脹、中毒,出現(xiàn)血管炎癥,管腔堵塞而形成血栓、組織壞死。立克次體也能進入血流而擴散,到達皮膚、肝、脾、腎等處而出現(xiàn)毒血癥癥狀。立克次體還能直接破壞血管內(nèi)皮細胞,使透性增加、血容量下降和水腫。另外,血管活性物質(zhì)的激活可加劇血管擴張,導致血壓降低,休克、DIC等。發(fā)病后期由于免疫復合物等的參與還可使病理變化和臨床表現(xiàn)加重。

由于立克次全是嚴格細胞內(nèi)寄生的病原體,其抗感染免疫是以細胞免疫為主,體液免疫為輔。病后一般能獲得較強的免疫性。感染后產(chǎn)生的特異性群和種抗體有中和毒性物質(zhì)和促進吞噬的作用。特異性細胞因子有增強巨噬細胞殺滅胞內(nèi)立克次體的作用。

三、診斷與防治

(一)微生物學檢查

1.分離培養(yǎng)立克次體感染的急性發(fā)熱期間病人血液中可有較多的病原體。除恙蟲病和立克次體痘用小白鼠分離外,其他均可采用接種雄性豚鼠腹腔,如體溫>40℃,有陰囊紅腫,表示有立克次體感染,應進一步將分離株接種雞胚或細胞培養(yǎng),用免疫熒光試驗等加以鑒定。

2.血清學試驗特異性試驗目前較多應用可溶性(群特異)抗原和/或顆粒性(種特異)抗原進行補體結合試驗和/或凝集試驗作確切診斷。

非特異性試驗是用變形桿菌某些菌株的菌株的菌體抗原代替立克次打開抗原以檢測相應抗體的凝集試驗,即外斐氏試驗?贵w效價≥1:160有意義。如晚期血清效價高于早期效價4倍以上也有診斷價值。但應注意外斐氏反應不能區(qū)別斑疹傷塞群和斑點熱群,而且對群內(nèi)各種立克次體也無鑒別作用。此外,變形桿菌所致的尿路感染、鉤體感染、嚴重肝病和懷孕等均可造成假陽性反應。

(二)防治原則

預防立克次體重點應針對中間宿主及儲存宿(節(jié)肢動物)加以控制和消滅。講究衛(wèi)生,消滅體虱有望根絕流行性斑疹傷寒;滅鼠、殺滅媒介節(jié)肢動物和個人預防是防止地方性斑疹傷寒、恙蟲熱、斑點熱的有效措施。目前國內(nèi)斑疹傷寒已基本控制,大城市中極為少見,恙蟲熱和Q熱也僅在東南沿海和西南地區(qū)時有發(fā)生。

在特異性預防上,以接種滅活疫苗為主,接種后有一定的成效。恙蟲熱因病原體抗原型別多、抗原性弱,至目前仍未獲昨滿意的疫苗;钜呙缯幱趯嶒炿A段。

氯霉素和四環(huán)素類抗生素對各種立克次體均有很好效果,能明顯縮短病程,大幅度降低病死率。但某些立克次體病的復發(fā)日漸增多,可能為藥物未能殺死所有病原體的緣故。病原體的最終清除仍有賴于機體免疫機能(尤其是細胞免疫)。

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