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醫(yī)學(xué)微生物學(xué):第二節(jié) 外界因素對(duì)細(xì)菌的影響

細(xì)菌在自然界必然不斷經(jīng)受周圍環(huán)境中各種因素的影響。當(dāng)環(huán)境適宜時(shí),細(xì)菌能進(jìn)行正常的新陳代謝而生長繁殖;若環(huán)境條件變化,可引起細(xì)菌的代謝和其他性狀發(fā)生變異;若環(huán)境條件改變劇烈,可使細(xì)菌生長受到抑制或?qū)е滤劳。因此掌握微生物?duì)周圍環(huán)境的依賴關(guān)系,在醫(yī)療實(shí)踐…

細(xì)菌在自然界必然不斷經(jīng)受周圍環(huán)境中各種因素的影響。當(dāng)環(huán)境適宜時(shí),細(xì)菌能進(jìn)行正常的新陳代謝而生長繁殖;若環(huán)境條件變化,可引起細(xì)菌的代謝和其他性狀發(fā)生變異;若環(huán)境條件改變劇烈,可使細(xì)菌生長受到抑制或?qū)е滤劳。因此掌握微生物?duì)周圍環(huán)境的依賴關(guān)系,在醫(yī)療實(shí)踐中,一方面可創(chuàng)造有利條件,促進(jìn)微生物的生長繁殖,從病理材料中分離培養(yǎng)病原微生物,有助于傳染病的診斷以及制備疫苗,來預(yù)防某些傳染病;另一方面,也可利用環(huán)境對(duì)細(xì)菌不利因素,抑制或殺滅病原微生物,以達(dá)到消毒滅菌的目的。本節(jié)重點(diǎn)介紹外界環(huán)境對(duì)細(xì)菌不利因素,提高對(duì)消毒滅菌的認(rèn)識(shí)以便在實(shí)際工作中加以應(yīng)用。

消毒(Disinfection)殺滅病原微生物的方法。用以消毒的藥物稱為消毒劑(Disinfectants)一般消毒劑在常用濃度下,只對(duì)細(xì)菌繁殖體有效。對(duì)于芽胞則需要提高消毒劑的濃度和延長作用的時(shí)間。

滅菌(Sterilization)殺滅物體上所有的微生物(包括病原體和非病原體的繁殖體和芽胞)的方法。因此,滅菌比消毒的要求高;但在日常生活中,消毒和滅菌這兩個(gè)術(shù)語往往通用。

無菌(Asepsis)物體上或容器內(nèi)無活菌存在的意思。無菌操作是防止微生物進(jìn)入機(jī)體或其他物品的操作技術(shù)。例如,進(jìn)行外科手術(shù)或微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),須注意無菌操作。

防腐(Antisepsis)防止或抑制微生物生長繁殖的方法。用于防腐的化學(xué)藥物稱為防腐劑。許多藥物在低濃度時(shí)只有 抑菌作用,濃度增高或延長作用時(shí)間,則有殺菌作用。

消毒與滅菌技術(shù)的選擇,取決于多種因素。在實(shí)際工作中應(yīng)根據(jù)消毒滅菌的對(duì)象和目的要求不同,以及條件的不同,選擇不同的合適方法。

一、物理因素

各種物理因素對(duì)細(xì)菌都能產(chǎn)生一定的影響作用。

(一)熱力滅菌

高溫對(duì)細(xì)菌有明顯的致死作用。熱力滅菌主要是利用高溫使菌體變性或凝固,酶失去活性,而使細(xì)菌死亡。但是,更細(xì)微的變化已發(fā)生于細(xì)菌凝固之前。有人認(rèn)為DNA單螺旋的斷裂可能是主要的致死因素。細(xì)菌蛋白質(zhì)、核酸等化學(xué)結(jié)構(gòu)是由氫鍵連接的,而氫鍵是較弱的化學(xué)鍵,當(dāng)菌體受熱時(shí),氫鍵遭到破壞,蛋白質(zhì)、核酸、酶等結(jié)構(gòu)也隨之被破壞,失去其生物學(xué)活性,與細(xì)菌致死有關(guān)。此外,高溫亦可導(dǎo)致胞膜功能損傷而使小分子物質(zhì)以及降解的核糖體漏出。干熱的致死作用與濕熱不盡相同,一般屬于蛋白變性、氧化作用受損和電解質(zhì)水平增高的毒力效應(yīng)。

熱力滅菌時(shí)最可靠而普遍應(yīng)用的滅菌法,包括濕熱滅菌和干熱滅菌法。

1.濕熱滅菌法

在同樣的溫度下,溫?zé)岬臍⒕Ч雀蔁岷茫湓蛴校孩俚鞍踪|(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān),含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分,因較大同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②溫?zé)釡缇^程中蒸氣放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所要溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅菌所需時(shí)間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大,使深部也能達(dá)到滅菌溫度,故濕熱比干熱收效好。

濕熱滅菌法包括有:

(1)煮沸法:煮沸100℃,5分鐘,能殺死一般細(xì)菌的繁殖體。許多芽胞需經(jīng)煮潮5~6小時(shí)才死亡。水中加入2%碳酸鈉,可提高其沸點(diǎn)達(dá)105℃。既可促進(jìn)芽胞的殺滅,又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。

(2)流通蒸汽滅菌法:利用100℃左右的水蒸汽進(jìn)行消毒,一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當(dāng)于我國的蒸籠),加熱15到39分鐘,可殺死細(xì)菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過大、過緊以利于蒸汽穿透。

(3)間歇滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽,以達(dá)到滅菌的目的。一般用流通蒸汽滅菌器,100℃加熱15~30分鐘,可殺死其中的繁殖體;但芽胞尚有殘存。取出后放37℃孵箱過夜,使芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再蒸一次,如此連續(xù)三次以上。本法適用于不耐高溫的營養(yǎng)物(如血清培養(yǎng)基)的滅菌。

(4)巴氏消毒法(Pasteurization):利用熱力殺死液體中的病原菌或一般的雜菌,同時(shí)不致嚴(yán)重?fù)p害其質(zhì)量的消耗方法。由巴斯德創(chuàng)用以消毒酒精類,故名。加溫61.1~62.8℃半小時(shí),或71.7℃15~30秒鐘。常用于消毒牛奶和酒類等。

(5)高壓蒸汽滅菌法:壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行的,是熱力滅菌中使用最普遍、效果最可靠的一種方法。其優(yōu)點(diǎn)是穿透力強(qiáng),滅菌效果可靠,能殺滅所有微生物。

目前使用的壓力滅菌器可分為兩類:下排氣式壓力滅菌器和預(yù)真空壓力滅菌器。適用于耐高溫、耐水物品的滅菌。

2.干熱滅菌法

干熱滅菌比濕熱滅菌需要更高的溫度與較長的時(shí)間。

(1)干烤:利用干烤箱,加熱160~180℃2小時(shí),可殺死一切微生物,包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。

(2)燒灼和焚燒:燒灼是直接用火焰殺死微生物,適用于微生物實(shí)驗(yàn)室的接種針等不怕熱的金屬器材的滅菌。焚燒是徹底的消毒方法,但只限于處理廢棄的污染物品,如無用的衣物、紙張、垃圾等。焚燒應(yīng)在專用的焚燒爐內(nèi)進(jìn)行。

(3) 紅外線:紅外線輻射是一種0.77~1000微米波長的電磁波,有較好的熱效應(yīng),尤以1~10微米波長的熱效應(yīng)最強(qiáng)。亦被認(rèn)為一種干熱滅菌。紅外線由紅外線燈泡產(chǎn)生,不需要經(jīng)空氣傳導(dǎo),所以加熱速度快,但熱效應(yīng)只能在照射到的表面產(chǎn)生,因此不能使一個(gè)物體的前后左右均勻加熱。紅外線的殺菌作用與干熱相似,利用紅外線烤箱滅菌的所需溫度和時(shí)間亦同于干烤。多用于醫(yī)療器械的滅菌。

人受紅外線照射較長會(huì)感覺眼睛疲勞及頭疼;長期照射會(huì)造成眼內(nèi)損傷。因此,工作人至少應(yīng)戴能防紅外線傷害的防護(hù)鏡。

(4)微波:微波是一種波長為1毫米到1米左右的電磁波,頻率較高,可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì),但不能穿透金屬表面。微波能使介質(zhì)內(nèi)雜亂無章的極性分子在微波場的作用下,按波的頻率往返運(yùn)動(dòng),互相沖撞和磨擦而產(chǎn)生熱,介質(zhì)的溫度可隨之升高,因而在較低的溫度下能起到消毒作用。一般認(rèn)為其殺菌機(jī)理除熱效應(yīng)以外,還有電磁共振效應(yīng),場致力效應(yīng)等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ與915MHZ兩種。微波照射多用于食品加工。在醫(yī)院中可用于檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無菌病室的食品食具、藥杯及其它用品的消毒。

微波長期照射可引起眼睛的晶狀混濁、睪丸損傷和神經(jīng)功能紊亂等全身性反應(yīng),因此必須關(guān)好門后才開始操作。

(二)電磁波與射線

1.日光與紫與外

日光是有效的天然殺菌法,對(duì)大多數(shù)微生物均有損害作用,直射殺菌效果尤佳,其主要的作用因素為紫外線,此外,熱與氧氣起輔助作用。但光線效應(yīng)受很多因素的影響,如煙塵籠罩的空氣、玻璃及有機(jī)物等都能減弱日光的殺菌力。

紫外線是一種低能量的電磁輻射,波長范圍為240~280nm,最適的波長為260nm,這與DNA吸收光譜范圍相一致。其殺菌原理是紫外線易被核蛋白吸收,使DNA的同一條螺旋體上相鄰的堿基形成胸腺嘧啶二聚體,從而干攏DNA的復(fù)制,導(dǎo)致細(xì)菌死亡或變異。紫外線的穿透能力弱,不能通過普通玻璃、塵埃,只能用于消毒物體表面及空氣、手術(shù)室、無菌操作實(shí)驗(yàn)室及燒傷病房,亦可用于不耐熱物品表面消毒。殺菌波長的紫外線對(duì)人體皮膚、眼睛均有損傷作用,使用時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。

2.電離輻射

包括高速電子、X線和r線等。具有較高的能量與穿透力,可在常溫下對(duì)不耐熱的物品滅菌,故又稱“冷滅菌”。其機(jī)理在于產(chǎn)生游離基,破壞DNA。可用于消毒不耐熱的塑料注射器和導(dǎo)管等;亦能用于食品消毒而不破壞其營養(yǎng)成份。

(三)濾過除菌法

將液體或空氣通過含有微細(xì)小孔的濾器,只允許小于孔徑的物體如液體和空氣通過,大于孔徑的的物體不能通過。主要用于一些不耐熱的血清、毒素、抗生素、藥液、空氣等除菌。一般不能除去病毒、支原體和細(xì)菌的L型。濾器的種類很多常用的有:

濾膜濾器(Membrane filter)由硝基纖維素制成薄膜,裝于濾器上,其孔徑大小不一,常用于除菌的為0.22um。硝基纖維素的優(yōu)點(diǎn)是本身不帶電荷,故當(dāng)液體濾過后,其中有效成分喪失較少。

蔡氏濾器(Seitz)是用金屬制成,中間夾石棉濾板,按石棉K、EK、EK-S三種,常用EK號(hào)除菌。

玻璃濾器是用玻璃細(xì)砂加熱壓成小碟,嵌于玻璃漏斗中一般為G1、G2、G3、G4、G5、G6六種,G5、G6可阻止細(xì)菌通過。

實(shí)驗(yàn)室等處應(yīng)用的超凈工作臺(tái),就是利用過濾除菌的原理去除進(jìn)入工作臺(tái)空氣中的細(xì)菌。

(四)超聲與超聲波(Ultrasonic and sonic waves)

每秒鐘超過200,000次振動(dòng)的聲波不被人耳感受,稱為超聲波。微生物對(duì)強(qiáng)度高的超聲波很敏感。其中以革蘭氏陰性菌最敏感,而葡萄球抵抗最強(qiáng)。雖然聲波強(qiáng)烈地振動(dòng)可使菌群死亡,但往往有殘存者。因此,這種方法在消毒滅菌方面無實(shí)用價(jià)值。主要用以裂解細(xì)胞分離提取細(xì)胞組分或制備抗原。超聲波滅菌的機(jī)理尚不清楚,可能是細(xì)菌外表受細(xì)微氣泡的作用,擾亂細(xì)胞內(nèi)容物及破壞細(xì)胞壁致細(xì)菌崩解而死亡。

(五)干燥

多數(shù)細(xì)菌的繁殖體在空氣中干燥時(shí)很快死亡,例如腦膜炎雙球菌、淋球菌、霍亂弧菌、梅毒螺旋體等。有些細(xì)菌抗干燥力較強(qiáng),尤其有蛋白質(zhì)等物質(zhì)保護(hù)時(shí)。例如溶血性鏈球菌在塵埃中存活25日,結(jié)核桿菌在干痰中數(shù)月不死。芽胞抵抗力更強(qiáng),例如炭疽桿菌耐干燥20余年。干燥法常用于保存食物。濃鹽或糖漬食品,可使細(xì)菌體內(nèi)水分逸出,造成生理性干燥,使細(xì)菌的生命活動(dòng)停止。

(六)低溫

多數(shù)細(xì)菌耐低溫。在低溫狀態(tài)下,這些細(xì)菌的代謝減慢,當(dāng)溫度如回升到適宜范圍又能恢復(fù)生長繁殖,故低溫常用作保存菌種。

二、化學(xué)因素

化學(xué)藥物能影響細(xì)菌的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活動(dòng),從而發(fā)揮防腐,消毒,甚至滅菌的作用。防腐劑的濃度高或作用時(shí)間長,也可達(dá)到消毒的目的。消毒及防腐藥物對(duì)人體組織有害,只能外用或用于環(huán)境消毒。

(一)化學(xué)消毒劑

1.化學(xué)消毒劑的種類

化學(xué)消毒劑的種類很多,其殺菌作用亦不盡相同。一般可根據(jù)用途與消毒劑的特點(diǎn)選擇使用(見表4-2)

表4-2 消毒劑種類、性質(zhì)與用途

類別名稱主要性狀用法用途
重金屬鹽類升 汞殺菌作用強(qiáng),腐蝕金屬器械0.05~0.1%溶液非金屬器皿消毒
紅 汞抑菌力弱,無刺激性2%水溶解皮膚粘膜,小創(chuàng)傷消毒
硫柳汞殺菌力弱,抑菌力強(qiáng),不沉淀蛋白質(zhì)0.01%溶液

0.1%溶液

生物制品防腐皮膚、手術(shù)部位消毒
硝酸苯汞同硫柳汞,難溶于水先配成1/1500高壓滅菌,衡釋至0.002%生物制口防腐
硝酸銀有腐蝕性1%溶液新生兒滴眼,預(yù)防淋球菌感染眼及尿道粘膜消毒
白銀銀有機(jī)化合物1~5%溶液
弱蛋白銀 10~20溶液
氧化劑高錳酸鉀弱氧化劑,穩(wěn)定0.1%皮膚,尿道消毒,蔬菜,水果消毒
過氧化氫新生氧殺菌,不穩(wěn)定3%口腔粘膜消毒
過氧乙酸20%市售品無爆炸然危險(xiǎn),性質(zhì)不穩(wěn)定,原液對(duì)皮膚、金屬有強(qiáng)烈腐蝕性0.2~0.5%塑料,玻璃,人造纖維消毒,皮膚消毒(洗手)

鹵素及其化合物氯氣刺激性強(qiáng),有毒0.2~0.5ppm飲水及游泳池消毒
白粉白色粉末,有效氯易揮發(fā),有氯味,腐蝕金屬,棉織品,刺激皮膚,晚易潮解乳狀液:10~20%乳液澄清液:乳狀液放24小時(shí)后,取上清液乳狀液:地面,廁所物消毒空氣,物品表面(0.5~1%噴霧)
漂粉精白色結(jié)晶,有氯味,含氯較穩(wěn)定0.5~1.5%一擔(dān)水加10%10ml飲水消毒地面,墻壁,家具消毒,飲水消毒:0.3~0.4kg/kg
氯胺白色結(jié)晶,有氯味,殺菌力較弱,可持久,腐蝕作用小0.2~0.5%水溶液室內(nèi)空氣及表面消毒(噴霧)0.1~0.2%浸泡衣服
二氯異氯
尿酸鈉
白色粉末,有氯味,殺菌力強(qiáng),較穩(wěn)定,含有效氯62~64%4ppm
3%
消毒水
消毒空氣(噴霧)
排瀉物,分泌物等
碘酒刺激皮膚,不能與紅汞同用2.5%碘酒(酊)皮膚消毒
醇類乙醇消毒力不強(qiáng),對(duì)芽胞無效70~75%溶液皮膚,體溫表消毒

甲醛溶液揮發(fā)慢,刺激性強(qiáng),浸泡物體表面消毒10%溶液浸泡,物品表面消毒.蒸汽消毒:10%溶液加等量水,蒸發(fā),密閉房間6~24h,或加斗量高錳酸鉀,產(chǎn)生黃色濃煙,消毒房間
戊二醛揮發(fā)慢,刺激性小,堿性溶液,有強(qiáng)大殺菌作用0.3%NaHCO3調(diào)整PH至7.5~8.5,配成2%水溶液消毒不能用熱力滅菌的物品(如精密儀器)

石炭酸
來 蘇
溶液殺菌力強(qiáng),有特殊氣味3~5%地面、家具、器皿表面消毒,2%皮膚消毒
表面活性bhskgw.cn新潔爾滅易溶于水,刺激性小,穩(wěn)定,對(duì)芽胞無效;遇肥皂或其他合成洗滌劑效果減弱0.05~0.1%外科洗手及皮膚粘膜消毒;浸泡手術(shù)器械
杜滅芬穩(wěn)定,易溶于水,遇肥皂或其他洗滌劑效果減弱0.05~0.1%皮膚創(chuàng)傷沖洗;金屬器械,棉織品、塑料、橡皮類物品消毒
己烷洗必泰白色結(jié)晶,穩(wěn)定.略溶于水,溶于醇.應(yīng)用其鹽類,與升汞配伍禁忌0.02~0.05%水溶液術(shù)前洗手(浸泡5分鐘),腹腔、膀胱等內(nèi)臟沖洗
烷基化合物環(huán)氧已烷常溫下無色氣體,沸點(diǎn)10.4℃,易燥易燃、有毒(100~200ppm對(duì)人能致死)50mg/1000ml密閉塑料袋手術(shù)器械、敷料等消
毒滅菌
染料龍膽溶于酒精,有抑菌作用,對(duì)葡萄球菌作用強(qiáng)2~4%水溶液,淺表創(chuàng)傷消毒
酸堿類醋酸
石灰
濃烈醋味
殺菌力強(qiáng),腐蝕性大
5~10ml/m3加等量水蒸發(fā)
加水1:4或1:8配成糊狀
消毒房間,控制呼吸道感染
消毒排泄物及地面

2.化學(xué)消毒劑的作用機(jī)制

不同的化學(xué)消毒劑其作用原理也不完全相同,大致歸納為三個(gè)方面。一種化學(xué)消毒劑對(duì)細(xì)菌的影響常以其中一方面為主,兼有其他方面的作用。

(1)改變細(xì)胞膜通透性 表面活性劑(Surface-active agent)、酚類及醇類可導(dǎo)致胞漿膜結(jié)構(gòu)紊亂并干擾其正常功能。使小分子代謝物質(zhì)溢出胞外,影響細(xì)胞傳遞活性和能量代謝。甚至引起細(xì)胞破裂。

(2)蛋白變性或凝固酸、堿和醇類等有機(jī)溶劑可改變蛋白構(gòu)型而攏亂多肽鏈的折疊方式,造成蛋白變性。如乙醇、大多數(shù)重金屬鹽、氧化劑、醛類、染料和酸堿等。

(3)改變蛋白與核酸功能基團(tuán)的因子作用于細(xì)菌胞內(nèi)酶的功能基(如SH基)而改變或抑制其活性。如某些氧化劑和重金屬鹽類能與細(xì)菌的-SH基結(jié)合并使之失去活性。

3.影響消毒劑作用的因素

(1)消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間各種消毒劑的理化性質(zhì)不同,對(duì)微生物的作用大小也差異。例如表面活性劑對(duì)革蘭氏陽性菌的滅菌效果比對(duì)革蘭氏陰性菌好,龍膽紫對(duì)葡萄球菌的效果特別強(qiáng)。

同一種消毒劑的濃度不同,其消毒效果也不一樣。大多數(shù)消毒劑在高濃度時(shí)起殺菌作用,低濃度時(shí)則只有抑菌作用。在一定濃度下,消毒劑對(duì)某種細(xì)菌的作用時(shí)間越長,其效果也越強(qiáng)。若溫度升高,則化學(xué)物質(zhì)的活化分子增多,分子運(yùn)動(dòng)速度增加使化學(xué)反應(yīng)加速,消毒所需要的時(shí)間可以縮短。

(2)微生物的污染程度微生物污染程度越嚴(yán)重,消毒就越困難,因?yàn)槲⑸锉舜酥丿B,加強(qiáng)了機(jī)械保護(hù)作用。所以在處理污染嚴(yán)重的物品時(shí),必須加大消毒劑濃度,或延長消毒作用的時(shí)間。

(3)微生物的種類和生活狀態(tài)不同的細(xì)菌對(duì)消毒劑的抵抗力不同,細(xì)菌芽胞的抵抗力最強(qiáng),幼齡菌比老齡菌敏感。

(4)環(huán)境因素當(dāng)細(xì)菌和有機(jī)物特別是蛋白質(zhì)混在一起時(shí),某些消毒劑的殺菌效果可受到明顯影響。因此在消毒皮膚及器械前應(yīng)先清潔再消毒。

(5)溫度、濕度、酸堿度消毒速度一般隨溫度的升高而加快,所以溫度越高消毒效果越好。濕度對(duì)許多氣體消毒劑有影響。酸堿度的變化可影響劑殺滅微生物的作用。例如,季胺鹽類化合物的戊二醛藥物在堿性環(huán)境中殺滅微生物效果較好;酚類和次氯酸鹽藥劑則在酸性條件下殺滅微生物的作用較強(qiáng)。

(6)化學(xué)拮抗物陰離子表面活性劑可降低季胺鹽類和洗比泰的消毒作用,因此不能將新潔爾滅等消毒劑與肥皂、陰離子洗滌劑合用。次氯酸鹽和過氧乙酸會(huì)被硫代硫酸鈉中和,金屬離子的存在對(duì)消毒bhskgw.cn效果也有一定影響,可降低或增加消毒作用。

(二)防腐劑

用于防腐的藥物稱為防腐劑。生物制劑(如疫苗、類毒素、抗毒素等)中常加入防腐劑,以防止雜菌生長。常用防腐劑有0.5%石炭酸、0.01%硫柳汞和0.1~0.2%甲醛等。

(三)化學(xué)療劑

用于治療由微生物或寄生蟲所引起疾病的化學(xué)藥物,稱為化學(xué)治療劑,化學(xué)治療劑具有選擇性毒性作用,能在體內(nèi)抑制微生物的生長繁殖或使其死亡,對(duì)人體細(xì)胞一般毒性較小,可以口服、注射;瘜W(xué)治療劑的種類很多,常用的有磺胺類、呋喃類和異煙肼等。

三、生物因素的影響

(一)噬菌體(Bacteriophage)

噬菌體是能感染細(xì)菌、放線菌、真菌、螺旋體的病毒。噬菌體分布廣泛,凡是有細(xì)菌存在的場所,就可能有相應(yīng)噬菌體的存在。噬菌體有嚴(yán)格的宿主特異性,只寄居于易感宿主菌體內(nèi)。

在電鏡下噬菌體有三種外形,蝌蚪形、微球形和線形。大多數(shù)噬菌體呈蜊蚪形,由頭部和尾部兩部分組成(圖4-1)。但也有無尾的噬菌體。較大的噬菌體頭部的形狀常為六棱柱體,頭部含有核酸,外圍繞一層蛋白質(zhì)外殼。少數(shù)噬菌體還具有包膜。噬菌體的尾部為噬菌體與細(xì)菌接觸的器官。不同的噬菌體尾部結(jié)構(gòu)差異很大。噬菌體的化學(xué)成份僅含蛋白質(zhì)及一種核酸,大部分噬菌體的核酸是DNA。噬菌體對(duì)理化因素的抵抗力較強(qiáng)。

圖4-1 大腸桿菌T2噬菌體結(jié)構(gòu)模式圖

1.噬菌體和宿主菌細(xì)胞的關(guān)系

噬菌體感染細(xì)菌時(shí),先通過尾刺或尾絲等特異地吸附到敏感細(xì)菌表面相應(yīng)受體上,當(dāng)噬菌體的尾插入細(xì)菌體時(shí),借助于尾部含有的一種溶菌酶類物質(zhì),將胞壁溶一小孔使尾鞘插入,噬菌體的核酸很快從尾部注入細(xì)菌細(xì)胞,而致細(xì)菌發(fā)生感染。細(xì)菌感染后可出現(xiàn)菌體裂解或形成溶源性細(xì)菌兩種結(jié)果(圖4-2)。

圖4-2 噬菌體與細(xì)菌的相互作用(噬菌體-宿主生活周期)示意圖

噬菌體核酸進(jìn)入細(xì)胞漿后,宿主細(xì)胞即停止合成細(xì)菌自身的DNA,轉(zhuǎn)而按噬菌體DNA所提供的遺傳信息合成新的蛋白質(zhì),包括一些合成噬菌體DNA所需的酶及噬菌體頭、尾部蛋白質(zhì)亞單位等。當(dāng)噬菌體DNA和蛋白質(zhì)分別合成以后,在細(xì)菌胞漿內(nèi)裝配成為完整的成熟噬菌全。當(dāng)它們?cè)鲋车揭欢ǔ潭,菌?xì)胞發(fā)生裂解,釋放出游離的噬菌體。噬菌體進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞后,能在敏感宿主菌內(nèi)復(fù)制增殖并使之裂解的噬菌體稱為毒性噬菌體(Virulent phage)。

有些噬菌體不在敏感細(xì)菌內(nèi)增殖,其基因整合于細(xì)菌基因組中,成為細(xì)菌DNA的一部分,當(dāng)細(xì)菌分裂時(shí),噬菌體的基因亦隨著分布至兩個(gè)子代細(xì)菌的基因中。這種噬菌體稱為溶源性噬菌體(Lysogenic phage)或溫和噬菌體(Temperat phage)。整合在細(xì)菌DNA上的噬菌體基因稱為前噬菌體(Prophage),帶有前噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌(Lysogeneic bacteria)。

溶源性噬菌體能正常繁殖,但這種帶噬菌體的溶源狀態(tài)有時(shí)能自發(fā)終止,結(jié)果導(dǎo)致噬菌體增殖而引起細(xì)菌裂解。用紫外線照射或過氧化氫等處理溶源性細(xì)菌,可誘導(dǎo)前噬菌體從細(xì)菌的DNA分開,而開始其溶菌性周期。偶爾溶源性細(xì)菌也可失去前噬菌體。

2.噬菌體在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中的應(yīng)用

(1)細(xì)菌的鑒定與分型噬菌體的作用具有高度特異性。一種噬菌體只能裂解一種或與該種相近的細(xì)菌,故可用于細(xì)菌的鑒定和分型。目前已利用噬菌體將金黃色葡萄球菌分為四個(gè)群數(shù)百個(gè)型,這種用噬菌體分型的方法,在流行病學(xué)調(diào)查上,對(duì)追查和分析這些細(xì)菌性感染的傳染源很有幫助。

(2)檢測標(biāo)本中的細(xì)菌應(yīng)用噬菌體效價(jià)增長試驗(yàn)檢查標(biāo)本中的相應(yīng)細(xì)菌,若在檢材中檢出某種噬菌體時(shí),常提示有相應(yīng)細(xì)菌存在。

(3)分子生物學(xué)研究的重要工具噬菌體基因數(shù)量少,有些噬菌體為某種遺傳基因缺陷株,有些噬菌體經(jīng)人工誘導(dǎo)的變異和遺傳容易控制和辯認(rèn),并且可用于基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)和變換等研究。近年來,噬菌體已成為遺傳研究中的主要的基因載體工具。

(二)抗生素(Antibiotic)

某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的,能抑制或殺滅其他微生物的一種化學(xué)物質(zhì)?股刂饕獊碓从诜啪菌、某些真菌和細(xì)菌。目前生產(chǎn)的抗生素,除從微生物培養(yǎng)液中提取外,有些已能人工合成或半合成。

抗生素的作用主要干擾病原微生物的代謝過程,從而起到抑菌或殺菌作用。抗生素的作用原理大體可概括以下方式:(1)抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成(如青霉素);(2)影響細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性(如多粘菌素);(3)抑制菌體蛋白質(zhì)的合成(如氯霉素、四環(huán)素);(4)抑制細(xì)菌核酸合成(如灰黃霉素)。

(三)細(xì)菌素(Bacteriocin)

是某些細(xì)菌產(chǎn)生的一類抗菌物質(zhì),作用譜窄,因而治療應(yīng)用價(jià)值不大。目前認(rèn)為有一定應(yīng)用價(jià)值的,只是在細(xì)菌的分型及流行病學(xué)的調(diào)查上。

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