（一)標本的采集
應符合以下幾個原則：①注意無菌操作，盡量避免雜菌污染；②在患者不同病程，根據(jù)不同病原菌在體內(nèi)的分布和排出部位，采取不同的標本；③應在發(fā)病急性期和使用抗生素之前采集；④盡可能采取病變明顯部位的材料；⑤標本必須新鮮，盡快送檢；⑥多數(shù)菌冷藏運送，少數(shù)菌需保溫；⑦標本應做好標簽，化驗單上填寫檢驗目的、標本種類和臨床診斷。
（二)病原菌的檢驗程序
1．直接涂片鏡檢 凡在形態(tài)和染色性上具有特征的病原菌，直接涂片染色后鏡檢有助于初步診斷。
2．分離培養(yǎng) 原為無菌部位采取的血液、腦脊液等標本，可直接接種至營養(yǎng)豐富的液體或固體培養(yǎng)基；從正常菌群存在部位采取的標本，應接種至選擇或鑒別培養(yǎng)基。同時要注意滿足氣體的要求。
3．生化試驗 如腸道桿菌包括多個菌屬，可利用不同基質(zhì)進行生化試驗予以區(qū)別。
4．血清學試驗 采用含有已知特異性抗體的免疫血清與分離培養(yǎng)出的未知純種細菌進行血清學試驗，可以確定病原菌的種或型。
5．動物試驗 主要用于分離、鑒定病原菌，測定菌株產(chǎn)毒性等。
6．藥物敏感試驗 對臨床選擇用藥有指導意義。
7．分子生物學技術(shù) 應用核酸雜交和PCR技術(shù)檢測病原菌核酸。基因芯片技術(shù)已成為研究開發(fā)熱點。
用已知的細菌或其特異性抗原檢測患者血液中有無相應特異抗體和其效價的動態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷，主要適用于抗原性較強的致病菌和病程較長的感染性疾病。
血清學診斷試驗最好取患者急性期和恢復期雙份血清標本，當后者的抗體效價比前者升高≥4倍者方有意義。
表7-1 血清學試驗種類與應用
| 血清學試驗 | 舉例 |
| 凝集試驗 直接凝集試驗 乳膠凝集試驗 冷凝集試驗 沉淀試驗 對流免疫電泳 補體結(jié)合試驗 中和試驗 | 檢查流感嗜血桿菌的抗體 支原體性原發(fā)性非典型肺炎 流行性腦膜炎 風濕熱（抗O試驗) |
1．特異性免疫獲得方式 ①主動免疫：通過患病、隱性感染獲得自然感染，或給機體接種疫苗（vaccine)、類毒素（toxoid)進行人工免疫。②被動免疫：通過胎盤、初乳等自然免疫獲得抗體，或是給機體注射抗毒素（antitoxin)等進行人工免疫。
2．人工免疫的概念和臨床常用制劑
①人工主動免疫（artificial active immunity)：是將疫苗或類毒素等抗原物質(zhì)接種人體，使機體產(chǎn)生特異性免疫力的一種措施。疫苗可分為死疫苗、減毒活疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗，從功能上又可分為預防性疫苗和治療性疫苗。免疫出現(xiàn)時間慢（2～4周)，維持時間長（數(shù)月～數(shù)年)，主要用于預防。
②人工被動免疫（artificial passive immunity)：是注射含有特異性抗體的免疫血清或細胞因子，使機體立即獲得特異性免疫，因而作用及時，但維持時間短，僅2～3周，主要用于治療或緊急預防。常用的生物制品是抗毒素、抗菌血清、胎盤球蛋白、丙種球蛋白和細胞免疫制劑。
【A型題】
1.有關(guān)“病原菌檢測的標本采集”的敘述，哪一項是錯誤的：
A.最好在使用抗生素前采集標本 B.采集的標本應盡快送檢
C.應注意無菌操作D.采集的標本應在低溫下保存
E.按病變部位和病期決定采集不同的標本
2.目前可用類毒素進行預防的疾病是：
C.破傷風與結(jié)核病 D.白喉與破傷風
E.百日咳與白喉
3.抗毒素：
A.為外毒素經(jīng)甲醛處理后獲得
B.用于人工主動免疫
C.可中和與易感細胞結(jié)合的外毒素的毒性作用
D.可中和內(nèi)毒素的毒性作用
E.使用原則是早期、足量、防過衛(wèi)生資格考試網(wǎng)敏反應
4.類毒素：
A.為內(nèi)毒素經(jīng)甲醛處理后獲得 B.能中和外毒素的毒性作用
C.可刺激機體產(chǎn)生抗毒素D.為抗毒素經(jīng)甲醛處理后獲得
E.可用于人工被動免疫
5.類毒素:
A.有抗原性，有毒性 B.無抗原性，有毒性
C.有抗原性，無毒性 D.無抗原性，無毒性
E.僅有半抗原性，無毒性
6.對細菌種屬的鑒定，下列哪一項不是必須的:
A.形態(tài)染色觀察 B.分離培養(yǎng)
C.生化反應D.血清學試驗
E.藥敏試驗
7.直接涂片鏡檢:
A.不能快速診斷細菌感染
B.適用于所有細菌感染疾病的初步檢查
C.只適用于形態(tài)和染色性上具有特征的病原菌
D.其結(jié)果必須結(jié)合臨床表現(xiàn)方有診斷價值
E.以上都不是
8.哪一項不能獲得有效的特異性免疫:
A.新生兒吸吮初乳 B.注射丙種球蛋白
C.接種卡介苗D.破傷風病愈后
E.流腦流行期無癥狀感染者
9.使用時要注意防止發(fā)生Ⅰ型變態(tài)反應的制劑是:
A.干擾素 B.類毒素
C.抗毒素 D.丙種球蛋白
E.滅活疫苗
10.滅活疫苗優(yōu)于減毒活疫苗表現(xiàn)在：
A.免疫效果較好且持久 B.接種次數(shù)及劑量較少
C.可產(chǎn)生局部免疫作用 D.疫苗保存期長,易于運輸
E.注射的局部和全身性副反應輕微
11.診斷風濕熱的抗O試驗屬于：
A.中和試驗 B.沉淀試驗
C.補體結(jié)合試驗 D.直接凝集試驗
E.乳膠凝集試驗
12.有關(guān)“核酸疫苗”的敘述，哪一項是錯誤的：
A.包括DNA疫苗和RNA疫苗B.熱穩(wěn)定性差
C.免疫維持時間長 D.誘發(fā)機體產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫
E.由免疫原編碼基因與載體(如質(zhì)粒DNA)組成
【X型題】
13.有關(guān)“疾病━血清學診斷方法”的組合，哪幾項是正確的:
A.傷寒━肥達反應B.風濕病━抗“O”試驗
C.斑疹傷寒━外斐反應 D.結(jié)核病━結(jié)核菌素試驗
E.梅毒━USR試驗
14.注射或接種哪一項而獲得免疫的方式稱為人工被動免疫。
A.破傷風抗毒素（TAT) B.卡介苗（BCG)
C.百日咳疫苗 D.脊髓灰質(zhì)炎疫苗（OPV)
E.免疫球蛋白
15.下述哪一項檢查能協(xié)助臨床診斷:
A.膿汁涂片找到革蘭陽性葡萄球菌 B.咽拭子涂片找到革蘭陰性雙球菌
C.腦脊液涂片找到革蘭陰性桿菌 D.痰標本涂片找到抗酸桿菌
E.淤斑血涂片找到革蘭陰性雙球菌
16. 有關(guān)“減毒活疫苗與滅活疫苗”的敘述，哪幾項是錯誤的：
A.滅活疫苗需接種多次，減毒活疫苗一般只需接種一次
B.滅活疫苗的免疫效果優(yōu)于減毒活疫苗
C.滅活疫苗不能誘導機體產(chǎn)生SIgA，而減毒活疫苗可誘導產(chǎn)生
D.滅活疫苗的保存期比減毒活疫苗長
&n執(zhí)業(yè)護士網(wǎng)bsp; E.滅活疫苗的免疫力維持時間比減毒活疫苗長
17.人工被動免疫的特點包括:
A.免疫物質(zhì)為類毒素 B.免疫物質(zhì)是丙種球蛋白
C.免疫物質(zhì)是抗毒素 D.可用于緊急預防
E.主要用于治療
18.利用微生物的毒力變異制成的活疫苗不包括：
A.卡介苗 B.麻疹疫苗
C.流腦疫苗 D.脊髓灰質(zhì)炎口服疫苗
E.乙型肝炎疫苗
[思考題]
19．對一疑似傷寒（或流行性腦脊髓膜炎)的患者，你如何進行微生物學檢查？
20．試述核酸疫苗、亞單位疫苗、滅活疫苗和減毒活疫苗的主要區(qū)別。
【A型題】
1.D 2.D 3.E 4.C5.C
6.E 7.D 8.D 9.C 10.D
11.B 12.B
【X型題】
13.A B C D 14.A E 15.A C D E
16.BE 17.B C D E 18.C E
【題1】 標本不能及時送檢時一般應置于4℃保存，但少數(shù)不耐寒冷的腦膜炎球菌、淋球菌等要保暖，否則將不能分離出該菌。
【題7】 凡是在形態(tài)和染色性上具有特征的致病菌，直接涂片染色后鏡檢有助于初步診斷。在少數(shù)情況下，對形態(tài)無特征的細菌也可用免疫熒光抗體染色鏡檢進行快速鑒定，其結(jié)果均必須結(jié)合臨床表現(xiàn)方才有診斷價值。
