方法名稱: |
貫葉連翹及提取物-金絲桃苷的含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
用于貫葉連翹及提取物中金絲桃苷的含量測(cè)定 |
方法原理: |
本品細(xì)粉加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在360 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 美國(guó)Agilent 1100 型高效液相色譜儀(含四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、ChemStation色譜工作站) 色譜條件 色譜柱:依利特Kromasil C18( 4. 6 mm×200 mm,5 μm);流動(dòng)相:甲醇-0. 5%磷酸( 45:55,v/v,用三乙胺調(diào)pH至3. 0);流速:1. 0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):360 nm;柱溫:35 ℃ |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取金絲桃苷對(duì)照品4. 93 mg,置5 mL棕色量瓶中,加甲醇超聲溶解并稀釋至刻度,搖勻制得0. 986 mg/mL對(duì)照品貯備液。從中精密量取200 μL加甲醇稀釋至1 mL棕色量瓶,制成0. 1972 mg/mL對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 1)原藥材供試品溶液的制備:取貫葉連翹藥材粉碎,過(guò)80目篩,混勻,稱取28 mg,精密稱定,置5 mL量瓶中,加適量甲醇,超聲處理30 min溶解,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,以5000 r/min離心5 min,取上清液經(jīng)0. 20 μm PTFE濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得。2)提取物供試品溶液的制備:稱取貫葉連翹提取物15 mg,精密稱定,置10 mL棕色量瓶中,加適量甲醇,超聲處理30 min溶解,加甲醇稀釋至刻度,經(jīng)0. 20 μm PTFE 濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得提取物供試品溶液。 |
操作步驟: |
分別精密吸取金絲桃苷對(duì)照液以及貫葉連翹及提取物供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算金絲桃苷含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
張俊松,王曉利,羅謙,等. HPLC測(cè)定貫葉連翹及提取物中偽金絲桃素和金絲桃苷的含量. 中成藥.2006,28(5):709~712 |