方法名稱: |
辣椒制品—辣椒素—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于辣椒制品中辣椒素含量的測(cè)定 |
方法原理: |
本品加入甲醇+四氫呋喃(50+50)混合溶液超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在280 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 高效液相色譜儀(Agilent 1100),美國(guó)安捷倫公司 色譜條件 色譜柱:Agilent Zorbax SB-C18(5 μm,250×4.6 mm);流動(dòng)相:V(甲醇):V(水)=80:20;流速:0.8 mL/min;柱溫30.0℃;檢測(cè)波長(zhǎng):280 nm;進(jìn)樣量:10 μL |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液制備 精確稱取25 mg辣椒素和25 mg二氫辣椒素放入經(jīng)甲醇洗滌過(guò)的燒杯中,加入少量甲醇溶解,然后溶液轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中,用甲醇定容,作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。分別精密量取辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)貯備液各1 mL置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。 供試品溶液制備 將辣椒制品搗碎、均質(zhì),準(zhǔn)確稱取2.5g樣品于100 mL燒杯中,加入甲醇+四氫呋喃(50+50)混合溶液25 mL,用塑料薄膜封口,然后使用超聲波清洗器提取30 min。用濾紙過(guò)濾,收集濾液,然后將濾渣連同濾紙重新用甲醇+四氫呋喃(50+50)混合溶液25 mL,使用超聲波清洗器提取10 min,重復(fù)兩次。將三次過(guò)濾收集的濾液合并并濃縮,然后用甲醇+四氫呋喃(50+50)混合溶液定容至50 mL,經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取辣椒素對(duì)照液以及辣椒制品供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算辣椒素含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
王燕,夏延斌,熊科等.高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器測(cè)定辣椒制品中辣椒素的含量.食品科學(xué). 2006.27(9): 193~196 |