軟組織亦稱間葉組織，它的廣義包括結締組織、脂肪組織、肌肉、血管、滑膜、周圍神經以及骨組織等。本節(jié) 研究的對象為來源于這些組織的腫瘤，與一些與之相關但組織發(fā)生尚不太明了的腫瘤的免疫細胞化學標記。軟組織惡性腫瘤雖然只占人體全部惡性腫瘤的1%左右。但由于這類腫瘤形態(tài)很相似。在常規(guī)切片下確定其組織發(fā)生，常是臨床病理診斷中的難題之一，為病理工作者所關注。由于免疫細胞化學的發(fā)展，研制成許多標記抗體，提供了確定軟組織腫瘤的組織發(fā)生的和鑒別診斷應用的標記抗體。但是有的抗體特異性不夠，存在交叉反應以及腫瘤細胞的異質性、多向分化潛能等問題，致該項技術僅為臨床診斷解決了部分問題，尚有許多問題有待進一步解決。
用于軟組織腫瘤可在石蠟切片表達的抗體已有多種，請參見表12-1。
表12-1 軟組織細胞可用的標記抗體
| 抗原名稱 | 標記細胞 |
| （1)角蛋白（Keratin) | 上皮與肌上皮細胞 |
| （2)波紋蛋（Vimentin) | 間葉分化細胞、內皮細胞 |
| （3)結蛋白（Desmin) | 肌組織分化細胞 |
| （4)肌動蛋白（Actin) | 肌細胞，肌上皮細胞，肌纖維 |
| （5)肌漿球蛋白（Myosin) | 肌母細胞，部分內皮細胞及肌bhskgw.cn/wszg/細胞 |
| （6)層粘蛋白（Laminin) | 平滑肌與雪旺氏細胞，基底膜 |
| （7)纖維連接蛋白（Fibronectin) | 間葉細胞，纖維—組織細胞及滑膜細胞，間皮細胞 |
| （8)第VII因子（Factor VII rag) | 血管內皮細胞 |
| （9)肌球蛋白（Myoglobin) | 骨骼肌細胞 |
| （10)S—100蛋白（S—100protein) | 周圍神經，朗格罕氏細胞，黑色素細胞、單核/巨噬細胞，淋巴結內的小結樹突細胞。 |
| （11)髓鞘基質蛋白（Myelin basic protein) | 周圍神經細胞 |
| （12)a—1 抗胰蛋白酶（α—Antitrypsin) | 組織細胞 |
| （13)a—1 抗糜蛋白酶（α—1Antichymotrypsin | 組織細胞 |
| （14)溶菌酶（Lysizyme) | 組織細胞、粒細胞、軟骨細胞 |
| （15)酸性磷酸酶（Acid phosphatose) | 骨與軟骨細胞 |
| （16)堿性碗酸酶（Alkaline phosphatase) | 骨與軟骨細胞 |
上述各種抗原抗體標記效果一般與其被標記細胞含抗原量呈正相關。一般良性瘤與正常細胞的反應相一致。而惡性腫瘤由于分化差，標記反應與分化程度呈平行關系，分化很低者則可呈弱或陰性反應。例如Lysozyme與myosin在惡性腫瘤可不表達。要注意中間絲抗體在各種間葉細胞之間有交叉反應。尤其是波紋蛋白抗體更為廣泛。賴日權等報告（1990年)發(fā)現128例上皮性腫瘤中有45例（35.1%)有波紋蛋白表達。因此告誡我們最好應用幾種同功效抗體一起標記，并結合組織學改變綜合分析，評價標記效果更為準確。
（一)纖維組織與纖維組織細胞性腫瘤免疫細胞化學標記
纖維組織腫瘤缺少專一性抗體標記。特別分化較低的纖維肉瘤，一般應用Masson或Van Gieson染色，再用肌源性抗體等排除法來確診，對雙向分化的惡性纖維組織細胞瘤，應采用纖維與組織細胞兩種標記抗體。即可應用Vimentin和抗胰蛋白酶或抗糜蛋白酶抗體標記取得滿意的結果，如果是多形性惡性纖維組織細胞瘤常與多形性脂肪肉瘤及多形性橫紋肌肉瘤相混，鑒別困難時，則應輔以肌球蛋白等抗體進行區(qū)別。
（二)肌源性腫瘤的免疫細胞化學標記
1．平滑肌腫瘤平滑肌腫瘤在HE染色組織學改變可與纖維性，神經纖維性及纖維組織細胞腫瘤相混淆。目前缺乏對平滑肌的專一性抗體，只有采用間接排除法。肌動蛋白，肌漿球蛋白及結蛋白對平滑肌腫瘤標記強陽性，而組織細胞陰性。加上肌球蛋白和S—100蛋白表達陰性則排除了纖維組織細胞瘤和神經源以及橫紋肌腫瘤。層粘蛋白可在平滑肌和雪旺氏細胞腫瘤陽性表達，可用此區(qū)別纖維性腫瘤。
2．骨骼肌腫瘤多形性橫紋肌肉瘤如果能找到有橫紋的帶狀肌母細胞，比較易于確診，但有時找不到帶狀肌母細胞，易與多形性惡性纖維組織細胞瘤混淆。小細胞性胚胎性橫紋肌肉瘤則與軟組織惡性淋巴瘤，尤文氏肉瘤，周圍性神經母細胞瘤難于鑒別。應用比較特異的肌球蛋白抗體就可識別。肌漿球蛋白和結蛋白抗體亦可作陽性標記，因為平滑肌腫瘤不可能是小細胞性，另外加用白細胞共同抗原（LCA)和S—100抗體則能排除淋巴瘤和神經母細胞瘤。在實際工作中要引起我們注意的是有時一些小細胞肉瘤浸潤人橫紋肌組織，在瘤細胞中混雜一些萎縮狀橫紋肌細胞，出現肌球蛋白抗體陽性，而不是橫紋肌肉瘤。另外子宮內膜混合性Mulleriam肉瘤，Wilm’s瘤及惡性蠑螈瘤中出現橫紋肌源瘤細胞，肌球蛋白抗體標記陽性，這對預后估計有幫助。Eusebi強調侵入骨骼肌的惡性上皮性細胞也可呈現肌球蛋白陽性表達，應特別注意。
（三)血管源腫瘤免疫細胞化學標記
1．血管內皮瘤與肉瘤第Ⅷ因子抗體對血管內皮細胞是很有用的標記物，尤其是良性血管瘤或血管內皮瘤。而在血管內皮肉瘤，腫瘤性內皮細胞分化低者可為弱陽性或陰性。最近有文獻報道，波紋蛋白對內皮細胞也有良好的標記作用。陽性內皮細胞位于網狀纖維包圍之中也是血管肉瘤的一個形態(tài)學特點。
2．血管周邊細胞腫瘤血管周邊細胞是包被在血管基底膜之外，是一種多能干細胞。它可能產生的腫瘤有血管周邊瘤或肉瘤，血管球瘤及Kaposi’s肉瘤。分述如下：
（1)血管周邊細胞瘤或肉瘤：瘤細胞包繞在裂隙狀血管之外周，周邊細胞第Ⅷ因子陰性而瘤細胞之間富于纖維連接蛋白。但這些抗體是非特異性的，最好用多種抗體來排除其他腫瘤的可能性。
（2)血管球瘤：目前認為其增生的瘤細胞也可能來自血管周邊細胞，在瘤細胞內外均顯豐富的肌動蛋白和肌漿球蛋白。診斷時要注意發(fā)生部位及組織學特點。
（3)Kaposi’s肉瘤：至今該瘤的組織發(fā)生尚有爭論。多數認為是血管內皮細胞發(fā)生，但其臨床表現與發(fā)展過程有別于血管肉瘤。其由惡性短梭形細胞組成，間以許多間隙，內有紅細胞，新近Guarda等報道梭形細胞第Ⅷ因子陽性，但也有陰性。有的作者認為該腫瘤來源于淋巴管內皮的可能性大于血管內皮。Barsky指出，應用抗基底膜抗體可以區(qū)別血管與淋巴管，后者缺乏。
（四)雙向分化的軟組織腫瘤免疫細胞化學標記
這里的雙向分化是指有纖維性與上皮性兩種瘤細胞為主構成的腫瘤。電鏡觀察證明腫瘤細胞包括未分化間葉細胞，上皮性細胞以及介于兩者之間的中間細胞，這里討論的雙向分化腫瘤包括滑膜肉瘤，間皮肉瘤、上皮樣肉瘤腦膜瘤或肉瘤的免疫細胞化學標記，現分述如下：
1．滑膜肉瘤滑膜肉瘤是由纖維型與上皮型兩種細胞組成的雙向分化腫瘤。分化高者上皮細胞呈腺樣或裂隙排列，與纖維型瘤細胞分界清楚。而分化低者兩型瘤細胞混染組成，分界不清。也有以某一成分占優(yōu)勢的單相滑膜肉瘤。應用纖維連接蛋白纖維型瘤細胞漿內陽性。有別于其他肉瘤細胞在細胞外陽性。波紋蛋白亦可陽性。上皮型成分細胞角蛋白陽性。組織細胞標記抗體陰性。纖維細胞型單相滑膜肉瘤應與纖維肉瘤及纖維母細胞性惡性纖維組織細胞鑒別，可用纖維連接蛋白來區(qū)別。另外再加用組織細胞與上皮性標記來輔助區(qū)別。
2．上皮樣肉瘤該腫瘤的組織發(fā)生尚未完全肯定。但認為與滑膜肉瘤有相關性。在電鏡上得到支持。它亦有纖維型和趨上皮分化傾向。瘤細胞呈結節(jié) 狀排列，中央易見到壞死。免疫組化顯示細胞內纖維連接蛋白、肌動蛋白及波紋蛋白陽性表達。
3．間皮瘤或肉瘤按WHO分類分為上皮型，纖維型及混合型。一般波紋蛋白對梭形細胞及部分上皮型細胞陽性表達。而細胞角蛋白對上皮型及部分梭形細胞陽性。
4．腦膜瘤與肉瘤良性腦膜瘤一般易于診斷，但惡性（間變型)腦膜瘤常規(guī)切片確診比較困難、組織學類型有纖維肉瘤樣型，血管肉瘤樣型，巨細胞肉瘤樣型等。電鏡證實由未分化原始間葉細胞、中間型細胞、梭形細胞、巨細胞、上皮樣細胞組成，具有雙向分化的特點。潘傳敬等對18例間變型腦膜瘤做多種抗體標記顯示：一般良性腦膜瘤不同型瘤細胞對波紋蛋白、EMA、角蛋白及S—100蛋白均呈陽性反應。而在惡性腦膜瘤則未分化細胞全陰性。而中間型細胞則除S—100以外其余抗體可均陽性。梭形細胞波紋蛋白與S—100陽性。巨細胞與上皮細胞與中間型細胞反應相同。
（五)脂肪源腫瘤免疫細胞化學標記
脂肪肉瘤由脂母細胞和前母細胞組成，有高分化型，粘液型，圓細胞及多形細胞型，后兩型與未分化肉瘤與多形性橫紋肌肉瘤，惡性纖維組織細胞瘤很難區(qū)別。如果僅憑有無脂母細胞來確診是不行的。因為“惡性纖維組織細胞”亦有脂肪染色陽性細胞。但脂肪肉瘤缺乏特異性免疫組化標記抗體。S—100蛋白對成熟脂細胞陽性，但脂肪肉瘤陰性。目前只有采用系列性抗體來排除多形性橫紋肉瘤與惡性纖維組織細胞而確診。
（六)外周神經腫瘤免疫細胞化學標記
惡性神經鞘瘤常與纖維肉瘤、低分化滑膜肉瘤相混淆。但應用S—100、NSE、髓鞘基質蛋白均為陽性標記物。外周神經母細胞瘤與軟組織淋巴瘤、Ewing肉瘤等難于區(qū)別。但應用S—100蛋白標記可陽性。
（七)組織發(fā)生未定的軟組織腫瘤
至今組織發(fā)生尚未完全肯定的軟組織腫瘤有顆粒細胞瘤，腺泡狀軟組織肉瘤，尤文氏肉瘤，粘液樣軟骨肉瘤，腱鞘透明細胞肉瘤等�，F分述如下：
1．顆粒細胞瘤其形態(tài)學比較明確、HE亦易于確診。但其組織發(fā)生未定。過去認為它是肌源性的。但肌球蛋白陰性。而S—100、NSE為陽性表達。表明其可能是神經源性、Fisher用電鏡也證明了這點。
2．腺泡狀軟組織肉瘤本腫瘤形態(tài)特點也較明確。當初有人認為來源于雪旺氏細胞。但S—100陰性。Fisher等認為是肌源性發(fā)生，因為電鏡發(fā)現瘤細胞中有中間絲結蛋白與波紋蛋白。而Mukai持反對意見。認為這是非特異性的。免疫組化，肌球蛋白陰性。有人認為是非嗜鉻性副節(jié) 瘤。
3．軟組織尤文氏肉瘤本瘤由小細胞肉瘤細胞組成。它與腺泡狀橫紋肌肉瘤。神經母細胞瘤及轉移性小細胞癌很相似。它缺乏特異性標記抗體。波紋蛋白陽性，表明它來源于間葉細胞。應用肌球蛋白，S—100及NSE標記陰性而其他三種腫瘤分別陽性。再加作糖元染色，瘤細胞胞漿陽性而確定診斷。
4．腱鞘透明細胞肉瘤該腫瘤與腱鞘關系密切，成團的胞漿透明的瘤細胞。由于瘤細胞中含有一些色素。因此認為可能來源于滑膜或黑色素細胞。新近Chung和Enziger研究發(fā)現，至少有2/3的病例，S—100蛋白與melamin標記陽性。故來源于黑色素細胞的可能性大于滑膜。EM下瘤細胞中可見到發(fā)育不良的黑色素小體。
5．骨外粘液樣軟骨瘤（脊索樣肉瘤)這是一種十分罕見的病變。常見于下肢深部。組織學特點是成索與旋渦狀排列的小圓形瘤細胞。襯有粘液樣基質，可相似于惡性脊索瘤。免疫組化顯示溶菌酶陽性，但S—100蛋白陰性。而真正的脊索瘤相反。其他標記全為陰性。
骨腫瘤種類繁多，大體上分為生骨性，軟骨性，纖維性，纖維組織細胞性，破骨細胞性以及各種軟組織、骨髓細胞、胚胎殘余細胞產生的腫瘤等等�？磥韽碗s，實際上骨組織是由成骨（骨軟骨)性組織與一般間葉性細胞構成。后者與前述軟組織腫瘤相一致�？傮w上看骨腫瘤是在間葉組織基礎上的特殊性腫瘤。現重點將成骨，成軟骨及破骨性腫瘤的免疫細胞化學標記予以討論。
1．良性骨與軟骨腫瘤它們存在診斷上的困難是低分化的骨與軟骨肉瘤與間葉性血管外皮瘤，巨細胞瘤，“惡纖組”等不易區(qū)別。尤其是骨肉瘤有骨母細胞性，軟骨母細胞性，成纖維細胞性，毛細血管擴張性及小細胞性，則免疫組化標記將發(fā)生重要作用。成骨肉瘤中有無骨樣組織是與其他類似肉瘤鑒別的關鍵。目前骨樣組織較特異的標記抗體有堿性或酸性磷酸酶、骨生長骨白（bone growth protein, BGP)、骨形成蛋白（bonembhskgw.cn/yaoshi/orphogenetic protein, BMP)等抗體。骨肉瘤中胃樣組織陽性、其他軟組織肉瘤陰性。Iwasaki等報告MGP標記33/35例骨肉瘤，12/15例軟骨肉瘤陽性表達。其中軟骨肉瘤BGP陽性例數與病理性分級呈正相關。而“惡纖組”與巨細胞瘤中的多核巨細胞為陰性。而骨肉瘤中的瘤巨細胞（12/25)與骨樣組織陽性。高奉潯等報告BMP、波紋蛋白、肌動蛋白表達陽性對骨母細胞型骨肉瘤有診斷意義。BMP、Vimentin Actiu 及UEA-1 （荊豆凝集素)受體表達陽性對纖維母細胞型骨肉瘤有診斷價值。BMP、Vi－mentin 、Actin、UEA-1Ⅳ型膠原表達陽性對纖維母細胞型骨肉瘤有診斷價值。其中BMP對骨腫瘤有共同的特異性，而其他軟組織肉瘤為陰性。軟骨肉瘤基質S—100表達陽性。
2．骨巨細胞瘤目前研究認為破骨性多核巨細胞系由血源性單核細胞到骨組織內演變而成。因此它具有組織單核細胞的相同標記。而BMP與BGP表達陰性。其纖維型瘤細胞可有Vimentin 、Actin陽性表達。
