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免疫細(xì)胞化學(xué)在病毒學(xué)中的應(yīng)用

  免疫細(xì)胞化學(xué)在病理學(xué)中的應(yīng)用最為廣泛,并取得了很大成果。

  一、病毒抗原定位

  免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)十分適合于病毒和病毒抗原在組織培養(yǎng)和機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的生長(zhǎng)繁殖定位的觀察。

  1.核內(nèi)病毒定位犬肝炎,乙型肝炎核心抗原(HBcAg),shope乳頭狀瘤,腺病毒IV型等病毒定位于細(xì)胞核內(nèi)。

  2.先核后漿定位水痘、流感(甲、乙)、雞瘟、假狂犬病單純皰疹、腺病毒2,3,4,5,7型,多型瘤、勞斯探氏肉瘤病毒,先在核復(fù)制,隨后在胞漿中定位。

  3.先漿后核定位痘苗、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹等病毒是先在漿中復(fù)制,后進(jìn)入細(xì)胞核。

  4.核漿同時(shí)定位犬瘟熱、麻疹和小鼠白血病病毒等。

  5.胞漿內(nèi)定位腮腺炎、新城疫、仙臺(tái)病毒、流感、口蹄疫鸚鵡熱、狂犬病、小鼠脫足病、痘苗、墨內(nèi)山谷腦炎、馬腦炎、埃及101病毒、黃熱、乙型腦炎、痘病毒、天花等病毒。

  二、病毒感染過(guò)程

  用免疫細(xì)胞化學(xué)方法可以看到病毒從宿主的細(xì)胞到細(xì)胞,叢一個(gè)部位到另一個(gè)部位的擴(kuò)散過(guò)程,如用免疫熒光技術(shù)看到了犬肝炎病毒的血行擴(kuò)散;犬瘟熱病毒的淋巴和血行擴(kuò)散。免疫熒光雙重染色法用以觀察雙重病毒感染,如蜱傳染毒(TBE)和麻疹病毒同時(shí)感染羊胚腎細(xì)胞,看到雙重感染細(xì)胞中病毒抗原和核酸的分布不同于單種病毒感染者。

  三、腫瘤與病毒

  用免疫細(xì)胞化學(xué)可以觀察腫瘤病毒和細(xì)胞,病毒抗原和腫瘤抗原之間的互相關(guān)系。如在不能查出傳染病毒的腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了病毒抗原;在典型的肉瘤細(xì)胞胞漿中發(fā)現(xiàn)了勞斯(Rous)氏肉瘤病毒;對(duì)EB病毒與非洲淋巴瘤、鼻咽癌和白血病等的關(guān)系進(jìn)行了有價(jià)值的研究,并發(fā)現(xiàn)了與Eb 病毒感染有關(guān)的兩類抗原,調(diào)查了某些疾病病人和正常人血清中抗EB病毒抗體的分布情況。王文亮等在原發(fā)性肝癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和核心抗體。

  四、病毒計(jì)數(shù)

  五、病毒的快速診斷

  免疫細(xì)胞化學(xué)為病毒感染性疾病的快速診斷開(kāi)創(chuàng)了一個(gè)廣闊的道路(參見(jiàn)表16-2),最先用免疫熒光法作流感病毒快速診斷,證明有較高的特異性。隨后,對(duì)流行性乙型腦炎,脊髓灰白質(zhì)炎、呼吸道和肺炎腺病毒、皰疹病毒等進(jìn)行了臨床快速診斷,提高了診治效果。近年,利用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)EB病毒IgA抗體診斷鼻咽癌取得突破性成果,對(duì)于早期診治鼻咽癌作出了重大貢獻(xiàn)。在早期診斷流行性出血熱方面,免疫細(xì)胞化學(xué)方法更顯示了其優(yōu)越性,利用感染流行性出血熱病毒的細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)本,可以在發(fā)病的早期查出IgM抗體,作出早期快速診斷。檢測(cè)患者血清中的抗體和效價(jià),更有利于病毒感染性疾病的防治,也可直接檢查病變中的病毒。

表16-2 免疫細(xì)胞化學(xué)在病毒學(xué)的應(yīng)用

疾病 檢出對(duì)象 標(biāo)本 方法 敏感性 特異性 意義
各種立克次體病 抗體 血清 IIF 診斷
  抗原 病變組織 DIF 中~高 流病
            調(diào)查
呼吸道病毒感染 抗(IgM,IgG,IgA)病毒(RS,流感甲、乙副流感1,3,4,6b,腺病毒組、麻疹、腮腺炎、風(fēng)疹) 血清、腦脊液、其它體液、鼻咽部洗液、呼吸道分泌物、病變組織、活檢及尸檢材料、組織培養(yǎng)材料 IIF  診斷
IIF  中~高 中~高 同上
DIF     診斷
病毒性肝炎 HBsAg 血清、組織 DIF 輔診
HBV     IIF      
  HBcAg 血清、組織 IIF 輔診
      DIF      
HAV HA Ag 肝活檢 IIF 研究
皰疹病毒感染            
單純皰疹 抗原 皮膚刮屑 IIF 診斷
巨細(xì)胞病毒感染 抗體 血清 IIF 診斷
      ACIF      
帶狀皰疹 抗體 血清 IIF ACIF 輔診
EB病毒感染 抗體 血清 IIF 輔診
狂犬病 抗原 犬腦 DIF 受傷人確診
  抗體 血清 IIF 診斷
蟲(chóng)媒病毒感染 抗體 血清 IIF 診斷和流

 

馬腦炎           病調(diào)查

登革、黃熱圣路易腦炎

抗體

血清

IIF

同上

乙型腦炎

抗體

血清

IIF

診斷

無(wú)菌性腦炎

抗體

血清

IIF

診斷

出血熱、拉賽熱

抗體

血清

IIF

診斷流病

AIDS病毒

抗體

血清

IIF

調(diào)查

  注:ACIF:抗補(bǔ)體免疫熒光法:DIF:直接免疫熒光;IIF:間接免疫熒光(引自:黃策:免疫熒光和熒光免疫,1983)

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